TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR

Francis Crick in his office. Behind him is a m...
Francis Crick. Fuente: wikipedia

Francis Crick in his office. Behind him is a model of the human brain that he inherited from Jacob Bronowski. (Photo credit: Wikipedia)

¿A qué se denominan técnicas de biología molecular?

En principio se denomina así a todas las técnicas de laboratorio que se usan para aislar ADN o extraerlo en alta pureza, visualizarlo para ver su estado, cortarlo y pegarlo (nacimiento de la Ingeniería genética), amplificar una región en una enorme cantidad de moléculas (clonación de fragmentos en bacterias u otros vectores como virus y PCR), corte de una determinada región con enzimas de restricción para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de restricción (análisis de mutaciones por RFLP o Restriction fragment length polymorphism), que significa: diferencias en los tamaños de los fragmentos de restricción debido a polimorfismos en el ADN entre otras.

Aqui les dejo para que vean como se hace una extracción de ADN en forma casera. Hagan click aquí

Todas estas técnicas tiene diversas aplicaciones generalmente en el diagnóstico de enfermedades hereditarias, búsqueda de alelos mas o menos frecuentes asociados a una característica que nos interesa seleccionar, diagnóstico de contaminación bacteriana en alimentos (detección de Escherichi coli 0257, cepas diferentes de Salmonellas, Mycobacterium sp) diagnóstico viral o de infección viral (HIV, hepatitis C, PIF, otros), selección de marcadores moleculares para asistir en el mejoramiento genético de una especie, test de paternidad, diagnóstico de identidad forense, etc.

La primera técnica que todas las demás necesitan es la extracción del ADN, y para ello es necesario purificarlo desde cualquier tejido aunque usualmente se hace a partir de sangre. Se basa en una serie de lavados de la muestra y agregado de proteinasas que eliminan las proteínas del medio, detergentes para eliminar las membranas plasmáticas y luego ir purificando el ADN de esa mezcla de ARN proteínas y restos celulares.

Primeras etapas de la extracción de ADN, en este caso precipitado de células a partir de las cuales se obtendrá el ADN. Fuente: Science Photo library
ADN precipitado en alcohol Fuente: Science photo library. La figura muestra el pellet o precipitado de células a partir del cual se obtendrá el ADN

¿Como visualizamos el ADN?

Para poder visualizar el ADN debemos recurrir a los geles de Agarosa. Una vez extraído el ADN o hecha una reacción de PCR debemos verificar que el ADN está allí.

Para eso debemos preparar un gel de agarosa, con una serie de pocillos donde colocar las muestras para que queden sumergidas en el gel y este en un buffer o solución tampón conductor, como el ADN tiene carga negativa migrará hacia el polo positivo si le hacemos pasar una corriente eléctrica. De esta forma el ADN migra al polo positivo (ya que tiene carga negativa). Los fragmentos muy pequeños migran muy rápido en cambio los más grandes migran más lentamente, permaneciendo cerca del pocillo donde se depositaron. El ADN previamente o el gel deben ser teñidos con bromuro de etidio, que es un colorante naranja que emite ese color solo bajo luz UV. Como se intercala entre los nucléotidos del ADN, el fragmento de ADN se verá naranja.

gel red
Gel de control de amplificación por PCR teñido con bromuro de etidio y visto en un transiluminador de luz ultravioleta (UV de 302nm). La PCR se realizó de un segmento de un gen (exón) en tres individuos. 1er, 3ro y 4to pocillo contienen ADN de distintos animales que se amplificó. En el 2do pocillo (de izq. a derecha, no hubo amplificación), o sea falla de la técnica. En el ultimo pocillo (derecha) se ve un marcador de peso molecular, para indicar el tamaño de la banda de ADN (en este caso 130 pares de bases)
G210562-Samples_of_DNA_being_loaded
Fuente: Sciencephoto Library. Estos son los pocillos donde se siembra el ADN (con una micropipeta), se ven azules por otro colorante que se usa para ver por donde esta migrando el ADN sin necesidad de mirarlo bajo luz ultravioleta. Además el colorante azul contiene glicerol que ayuda a que el ADN baje rápidamente al fondo del pocillo

En el siguiente video se muestra como se realiza un gel de agarosa

La genética molecular aparece desde el descubrimiento de la doble hélice de ADN de Watson y Crick en 1954. Luego Francis Crickcontinúa con el descubrimiento del código genético en los 60’s. Es decir se descubrió que las bases del ADN se leen de a 3, y tres combinaciones de letras significan un aminoácido que formará parte de una proteína. Allí comienza a comprenderse como es la molécula de ADN y como lleva la información que contiene a la célula que la contiene. A esto se lo denominó “Dogma central de la biología molecular”.

Esquema del Código Genético

Luego aparece el descubrimiento de las enzimas de restricción que permiten cortar el ADN y así analizarlo. Nace allí la ingeniería genética. Eso permitió cortar y pegar a la molécula de ADN para estudiarla, analizar patologías en ciertos genes, etc. Hasta que, hacia fines de los 80’s, Karl Mullis descubre la técnica de PCR que revolucionó a la genética por su practicidad y rapidez para amplificar una región de ADN en cantidad suficiente para luego hacer todo tipo de análisis. Para saber si la PCR ha resultado, se colocan las muestras en pocillos de geles de agarosa, teñidos con bromuro de etidio (color naranja)

La técnica se describe en los videos que les dejo abajo

Para reírse un rato les dejo un video divertido llamado  “La canción de la PCR” de una empresa (BIORAD) que vende los termocicladores o Máquinas para automatizar la técnica para hacer PCR

La secuenciación o forma de determinar el orden de los nucléotidos en el ADN de cada cromosoma fue descubierta por Sanger

Gracias a este descubrimiento fueron posibles el uso de muchas técnicas para realizar tanto la secuenciación completa del genoma humano como el de muchos animales domésticos y ademas usar la secuenciaciónque hoy en día es automática y realizada por un secuenciador en múltiples aplicaciones.
Una de las aplicaciones de los secuenciadores es el fingerprinting o huellas de DNA que permite tanto la realización de test de paternidad como identificación de criminales. En las primeras épocas esta técnica de huellas de ADN descubierta por Sir Alec Jeffries y se realizaba por Southernblot, técnica denominada así en honor a su descubridor llamado de apellido Southern, pero hoy en día se realiza por PCR.
La primera técnica utilizada para la identificación de fragmentos de ADN fue el Southern blot. Se transfiere al ADN de un gel de agarosa a una membrana donde se hibridiza con una sonda marcada radioactivamente. Luego llegaron el northern (para detectar ARN) y el western para detectar fragmentos de ARN proteínas respectivamente.

La forma de llevar a cabo esta técnica se puede ver en el siguiente video

Método de Secuenciación descrito por Sanger y basado en el freno de la síntesis de ADN cuando se usan dideoxinucleótidos en vez de desoxiribonucleótidos. Parte de eso se explica en el video que les dejo abajo

Secuenciación de Sanger

Principios de fingerprint o identificación de huellas de ADN derivada de la primera técnica descrita por Sir Alec Jeffries.

Geles para evaluar uso de microsatélites o VNTRs (número variable de repeticiones en tandem) o fingerprints

Secuenciación basada en metodo de Sanger pero ahora realizada por un secuenciador automático.

Secuenciación de ADN automática (secuenciadores) basado en el uso de la técnica de Sanger usando fluorocromos

Aplicaciones de las técnicas

Son innumerables las aplicaciones de estas técnicas y las que más han sido usadas, son la PCR seguida de una restricción con enzimas y detección de los fragmentos en un gel o seguidas de un gel de poliacrilamida que tiene más definición para la separación de fragmentos de pocas bases de diferencias. Eso sí en los últimos años y con la baja en los precios de la secuenciación y los microarrays, se usa más la PCR seguida de secuenciación directa. Cuando se usa PCR y enzimas de restricción, a esa combinación de técnicas se las denominan PCR/RFLP (derivado de variación en la longitud de los fragmentos de restricción en ingles).

Las enzimas de restricción o también denominadas “endonucleasas” cortan los enlaces fosfodiéster del ADN cuando reconocen determinada combinación de nucléotidos o bases del ADN, generalmente de 6 o 4 pares de bases de longitud, llamadas secuencias palindrómicas, es decir que se leen igual en un sentido en una cadena y en el sentido opuesto en la cadena complementaria. Se utilizan mucho para el diagnóstico de enfermedades hereditarias causadas por una mutación puntual o detección de variantes o alelos de un gen favorable para el mejoramiento genético animal o vegetal.

¿Por que detectan mutaciones estas enzimas ?  porque como reconocen una secuencia específica de 6 o 4 pares de bases, al aparecer una mutación se puede perder el que era un sitio de corte para una enzima o al revés se puede generar un sitio de corte en el ADN.

Imágen
Fuente

Si podemos amplificar por PCR un segmento o porción de un gen, y luego le agregamos una enzima de restricción puede que se produzcan fragmentos, si en el ADN amplificado hay una o varias de esas combinaciones de 6 o 4 pares de bases. Quizás al comparar el gen normal con el mutado, se haya perdido o ganado un sitio de restricción para alguna de las miles de enzimas de restricción conocidas

armendariz_ch13_fig-13-01
Ejemplos de dos tipos de enzimas de restricción.

Algunas de las miles de enzimas conocidas son:

Algunas de las enzimas de restricción
Fuente ALL Science

A modo de ejemplo y usando la imagen de arriba, si  por una mutación de la secuencia que reconoce BamHI, en vez de CCTAGG se cambia a CTTAGG, en ese segmento de ADN se pierde el sitio de corte de BamHI porque deja de reconocerlo y no corta. De modo que en un alelo normal, la enzima BamHI corta, por ejemplo generando dos fragmentos pero en el alelo mutado ya no corta, con lo que veríamos en un gel, solo un fragmento.  (puede verse graficado abajo)

Esta técnica puede usarse entre otras cosas para detección de alelos de un gen normales y mutados (enfermedades hereditarias) o para distinguir cepas bacterianas o virales o alelos más favorables para una característica de interés productivo para luego aplicarlo a la selección.

Un esquema se muestra para ver en que se basa el diagnóstico

pcr-rflpalelos-normal-y-mutado
Esquema original de JPH Cor 2004, modificado por Gabriela Iglesias
Esquema original de JPH Cor 2004, modificado por Gabriela Iglesias

En el caso de los test de paternidad, hoy en día se hacen por PCR seguida de un análisis de unos 9 a 13 VNTRs (numero variable de repeticiones en tandem del tipo de los minisatélites o secuencias de a 10 hasta 60 bases que se repiten) en una misma reacción seguida de la visualización en geles de poliacrilamida con la ayuda de un secuenciador automático. En este caso se amplifican sitios específicos del genoma, que poseen un numero variable de secuencias repetidas. actgactgacgt actgactgactg actgactgactg actgactgatga actgactgactg En este caso son 12 pb que se repiten 4 veces en uno de nuestros cromosomas (el materno o paterno) o sea que quizás yo (Gabriela) poseea 3 repeticiones en el materno y 10 en el paterno. Otra persona podría tener 5 y 15, otra 10 y 12 etc. Cuanto más variable es el numero de repeticiones, más precisa es la técnica. De este tipo de repeticiones se amplifican por PCR varias distintas (localizadas en distintas regiones del genoma) 9 a 13 en cada individuo y los fragmentos se ven luego en geles y se separan por tamaños. El esquema de abajo muestra un ejemplo con sólo 3 repeticiones en el Individuo A, B y C. El tamaño de la banda de lo amplificado varía según el No de repeticiones que cada persona tenga. Otros tipos son los STRs (short tandem repeats o repeticiones cortas en tandem de 2 a 6 pb de longitud que se repiten) Por ejemplo GCGA.GCGA.GCGA etc

Imagen original de la Universidad de Arizona, traducida por Gabriela Iglesias
Ejemplo de 3 VNTRs en 3 diferentes individuos. Por ejemplo, se representan en distintos colores 3 pares de cromosomas homólogos y 3 VNTRs o repeticiones en tres cromosomas distintos. El No 1 en un cromosoma (azul ) con dos variantes en cada homólogo, por ejemplo en el materno 24 pares de bases (por ejemplo sea 6 repeticiones de 4 nucleótidos) y en el cromosoma paterno del Individuo A: unas 3 repeticiones de 4 bases: 12 nucleótidos en total. Eso da como resultado en un gel: dos bandas una de unas 24 pares de bases y una de 12 pares de bases. En la misma reacción de PCR se amplifican los tres minisatélites. Por ende cada individuo muestra un patrón de bandas, producto de la cantidad de bases de cada repetición por el numero de bases que se repiten de cada VNTR amplificado . En este caso el individuo A tiene las bandas de 24 y 12 del VNTR 1, una de menos de 5 bases y una de 15 bases del cromosoma verde (VNTR 2) y una de 10 y otra de 30 del cromosoma rojo (VNTR 3). Este individuo A es heterocigota para los 3 VNTRs Imagen modificada por Gabriela Iglesias

Otro ejemplo se ve en la siguiente imágen

En este caso hay otro ejemplo de dos VNTRs A y B en dos individuos 1 y 2. Cada VNTR tiene dos variantes o alelos, el A por ejemplo, A5 y A2 en el Individuo 1 o el A3 y A4 en el Individuo 2. Imagen obtenida de DNA Profiling
Análisis de varios VNTRS al mismo tiempo Fuente: Sciencephotolibrary

Usos en la criminología o medicina forense en este caso con Southern blot y RFLP

 

. Southern blot de uso forense Crédito de Pearson education
Test de ADN por southern blot de uso forense. Imagen de Lifecod Standford

Otros ejemplos de usos en test de paternidad se ven en la siguiente imagen.

Usos como en los test de paternidad de los STRs y VNTRs. Cada hijo debería mostrar que cada banda de un VNTR proviene o del padre o de la madre. Como se ve en la Hija No 1 (D1), o el el Hijo (S1), en cambio en el caso de la hija 2 (D2) parte de sus bandas las hereda de la madre pero no tiene las otras bandas provenientes del padre, al menos no todas. Probablemnete es hija de otro padre biológico. Finalmente el hijo S2 representado con bandas verdes, no comparte bandas ni del padre ni de la madre, por lo tanto podría ser un hijo no biológico. Imagen obtenida de DNA Profiling

Les dejo finalmente una clase en inglés sobre el tema pero pueden usar los títulos en español.

Ver presentaciones Power point en Pdf en descarga de archivos y Curso de Genética Molecular

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214 comentarios sobre “TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR”

  1. Hola Dra. Gabriela
    Podrías darme ejemplos de el uso de técnicas bioquímicas y/o moleculares en CLINICAS VETERINARIAS. Tengo la información de técnicas como electroforesis, Elisa, fraccionamiento celular, citometria de flujo, cristalografia de rayos X etc
    pero no se especificamente cuando se utilizan en una clínica veterinaria.
    espero puedas ayudarme, Gracias!!

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    1. Hola Paula, si en el Blog mismo está lleno de artículos de usos de electroforesis y PCR en Medicina veterinaria. Hya varias monografías hechas por alumnos de detección de enfermedades hereditarias en animales. te dejo dos links aqui pero hay más, solo tenes que buscar en el blog. Una es https://genmolecular.com/2017/12/11/monografias-de-alumnos-deficiencia-de-piruvato-quinasa-pk-en-caninos/ y la otra es https://genmolecular.com/2017/12/04/sindrome-overo-letal-blanco-olws-monografia-de-alumnos-genetica-basica/
      Espero te sirvan
      saludos

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      2. HOLA DRA! QUISIERA SABER SI SE PUEDE MEDIR EL DAÑO DE LA OXIDACIÓN DE PROTEÍNAS O ADN OCASIONADO POR RADICALES MEDIANTE UNA SECUENCIACION POR MÉTODO SANGER……..?

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    1. Hola Luz, eso sería por muchas tecnologías posibles, pero para decirte o comentarte alguna podrías usar un virus al que se le remueven los genes patógenos, y se le introduce el gen en cuestión (esto depende del tamaño del gen, si es muy grande..no se puede). Luego una vez que el virus está armado, se lo podrias inyectar al deportista (esta es una de las posibles formas) pero en esta página no lo tengo descripto. Vas a poder encontrarlo usando plásmidos bacterianos tambien o cromosomas artificiales o inlcuso se ha probado inyectando ADN. La tecnica para introducir un gen en un plasmido bacteriano se llama transformación. Buscala en google hay mucho lugares que lo describen o buscá terapia génica. Aqui solo hay decriptas algunas técnicas generales que son necesarias para hacer luego estas cosas, por ejmplo para crtar ADN necesitas enzimas de restriccion. Siento no haber escrito sobre el tema en detalle. Saludos

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    2. Hola Alexander, espero no llegar muy tarde a responderte.
      En el diagnóstico genético prenatal se hace el cariotipo (se hace una amniocentesis, vellosidades coriales). Sí, parece algo anticuado, pero nos dice si el feto tiene los 23 pares de cromosomas o no y también se pueden observar pequeñas variaciones en los patrones de bandas. La técnica de FISH es otra que se realiza. Por fluorescencia vemos si las células tienen dos cromosomas de cada uno (13, 18, 21, X e Y). Si el ecografista observa “algo extraño” y las pruebas de citogenéticas son normales, se realiza un CGH array. Aquí veremos si hay ganancia o pérdida de pares de bases, es bastante más específico ya que una microdeleción no se ve en el patrón de bandas del cariotipo.
      Si hablamos del diagnóstico genético PREIMPLANTACIONAL, pues bueno… aquí se extraen las blastómeras del embrión y se analizan. En estos casos vamos buscando algo más específico, se supone que la pareja ha tenido varios abortos de repetición y no se sabe por qué o que incluso ellos saben que son portadores de alguna enfermedad genética, entonces ya vas a secuenciar la parte del genoma donde sabes que ocurre la mutación a esa enfermedad. Además de hacer el test prenatal que incluyen los cromosomas que te nombré antes. Lo principal es la extracción de DNA y “meterlo” en el secuenciador.
      Sólo como apunte, la secuenciación masiva es el presente-futuro. Yo hice un postgrado en 2015 donde lo más novedoso era la NGS, la secuenciación de cuarta generación. En verano acabé el máster de reproducción asistida y ya la cuarta generación de secuenciación está “obsoleta”. Esto va muy muy rápido.
      Saludos!

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  5. Muy buen dia..! Doctora estoy leyendo su pagina, y la felicito, la encuentro muy interesante y enriquecedora, actualmente realizo mi trabajo de tesis y estoy muy confundida con una parte de mi metodologia, quisiera preguntarle en cuanto a las tecnicas moleculares para analisis microbiologico como checkerboard Hibridizacion, PCR, real timePCR , cual de ellas seria mejor o mas especifica y/o sensible para el analisis de calidad de colonizacion de microorganismos, o con cual podria trabajar mejor estadisticamente, cual es mas sensible o especifica?
    muchas gracias por su tiempo, agradezco toda la informacion que me pueda suministrar al respecto.

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    1. Hola vrmarisol, la verdad es que es no tengo experiencia en colonización de microorganismos como para aconsejarte cual es la mejor estrategia en la metodología. La mejor persona para responer eso es tu director/a de tesis. En caso de que aún no tengas bajá todos los artículos que tengas sobre el tema y fijate cual es la metodología más aplicada. Nada mejor que la bibliografía para basarse en algo concreto. Espero que tengas suerte. !! saludos

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  9. Hola, a todos para saber si alguien trabaja o ha trabajado con mycobacterium bovis, resulta que he implementado algunos protocolos de extraccion de ADN de mycobacterium bovis a partir de tejido bovino, en la cauntificacion con nanodrop tengo un promedio de 100ng/ul pero la pureza promedio 1.0, y no he logrado la amplificacion de mi fragmento que requiero para la identificacion molecular. Si alguen tiene un protocolo infalibrl de extraccion de adn para mycobacterium a partir de tejido por favor comuniquese conmigo.

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  13. ¿Cómo podría asegurarse que el material que ha purificado realmente es DNA
    Cómo podría saber si hay proteínas contaminando su preparación de DNA?
    Cómo podría asegurarse que el material que ha purificado realmente es DNA
    De ante mano muchas gracias !!! por si me pueden ayudar ..

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    1. Hola podrías medir la densidad óptica con un espectro fotometro. A 260 nanómetros y a 280 que es donde miden las proteínas. Luego sacas una relación entre ambas 260/280 y debe dar 1.6 a 1.8. Espero que te sirva

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  14. Hola buenas tardes, estaba leyendo un paper y me salio que utilizaron un analisis 2-DE del proteoma de B. cinerea ¿Alguién me podría explicar en que consiste esta tecnica o en su defecto otorgarme literatura donde pueda aprender esto? de antemano muchas gracias

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  15. Buenas tardes, tengo una duda al realizar mi PCR, para amplificar fragmentos ITS de hongos, en algunas ocasiones no obtengo amplicones, lo cual es raro por que previa extracción de DNA los leo en un nanodrop y observo que tengo calidad y cantidad de DNA.

    Muchas gracias de antemano.

    Saludos,
    Francisco

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    1. Francisco en mi experiencia, al menos las PCR a aveces no se sabe por que, no amplifican. Me ha pasado a veces que por meses una PCR que salí perfecta, dejaba de amplificar.
      Es una técnica con sus problemas…eso sí no te confies demasiado en el Nanodrop, siempre es bueno ver el ADN en un gel!!

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  16. hola quisiera urgente su ayuda en encontrar una técnica de extracción purificación identificación y cuantificación de DNA polimerasa B2 de la Entamoeba histolytica ……cualquier contribución con este tema sera muy agradecido, también con la caracterización de la enzima DNA ligasa de Trichomonas vaginalis.

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  17. Otra vez molestando.. Tengo que resolver un ejercicio y no lo entiendo. Ej: Para el control de paternidad en los caballos pura sangre de carrera utilizan los sig. microsatélites:
    -AHT4: tamañano de los alelos posibles 155, 180, y 204 pb
    -ASB2: tamaño de los alelos posbiles 80, 95 y 110 pb

    No sé que me está diciendo con eso!!! Me desespera jaja.

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    1. Matatac no sé que es lo que espera el profesor o prefesora que vos logres comprender pero como verás yo no dejo ejercicios en mi Blog, lo hago en clase con mis alumnos o por otras vías. Deberías preguntar a tu prefesor. Yo lo único que veo es que te dice es lo de posibles tamaños de los alelos de los microsatéiltes en la población general

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    1. Hola Matatac. bueno es que para diseñar la secuencia de los primers o cebadores que vas a necesitar tenés que saber que secuencia de bases hay en las afueras de la región que queres amplificar. De lo contarior sin primers lo que se amplificaría seria cualquier region de ADN en forma inespecífica

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  21. Buenos días, me gustaría saber si pueden enviarme información sobre las sondas de hibridación y los tipos que se usan para el diagnostico virológico. Tengo una exposición y no entiendo muy bien lo que aparece en la web. Soy estudiante de bioanálisis, por favor AYÚDENME

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    1. Hola Luida, aqui en esta página yo redacté algunos párrafos sobre las sondas que son usadas en las técnicas de Southern blot, Northen blot y/o western blot. No tengo más de lo que he puesto aquí. Buscaste en libros además de la web??

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  22. HOLA DOCTORA NECESITO AYUDA SOBRE LOS DIFERENTES INDICES DE SIMILITUD QUE EXISTEN PARA EL ANALISIS DE LA INFORMACION GENETICA,, COMO SE MIDE LA DISTANCIA GENETICA Y LA DIVERSIDAD GENETICA

    GRACIAS

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    1. Hola Lina, es un tema complejo si no lo conoces, pero en todo caso te dejo algunos links que podrían servir. Como no sé si me preguntas por distancia entre gens tambien te dejo un link de eso. Saludos
      http://es.wikipedia.org/wiki/Distancia_gen%C3%A9tica
      http://www.biodiversidad.gob.mx/pais/pdf/CapNatMex/Vol%20I/I14_Lavariabilidadgen.pdf
      http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/resource/view.php?id=36243
      http://www.google.com.ar/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=5&sqi=2&ved=0CFQQFjAE&url=http%3A%2F%2Fagr.unne.edu.ar%2FExtension%2FResumen%2FGenetica%2Fgene-008.doc&ei=B7J3T7rCO9DMtges4YTtDg&usg=AFQjCNEnU8LM3EX3VmEHFKatPFZtaaYecQ&sig2=HSVrcFDCxUYeIlh-UdYGCA
      http://www.ccg.unam.mx/~vinuesa/Curso_UANL08/PDFs/Tema7_m%C3%A9todos_dist_UANL_Monterrey_Jun08.pdf
      http://www.fagro.edu.uy/~genetica/docencia/materiales%20teoricos/ligamiento-mapas.pdf

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  23. buenas tardes me han dejado una tarea sobre tecnicas de clonacion en procariontes alguien me podria proporcionar articulos que hablen de las tecnica por favor

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  29. Pingback: Técnicas de biologia molecular. | Lo más interesante, de todo un poco.

  30. Quisiera saber donde podria hacer un curso de capacitación, postgrado o diplomado sobre la tecnica de PCR en la ciudad de Buenos Aires??? estoy muy interesada en ello, si tuviera un dato se lo agradeceria muchisimo !!!
    GRACIAS 🙂

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  31. Pueden colocar unos archivos, en relacion para el diagnostico de papiloma humano y cancer de mama , en referente al uso de pcr, y la secuencia de trabajo desde la obtencion del ADN hasta el resultato final .

    atte
    Zeta.
    Desde Lima

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  32. hola muy buenas noches primero que nada agradecer el buen trabajo en la realizacion de esta presentacio por otrolado me gustaria saber si me puedes ayudar necesito algunos articulos sobre el uso de la biologia molecular en la ciencia forense espero me puedas ayudar mi nombre es jesus estudiante de Licenciatura en la ENCB

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  33. Hola Dra.,necesito de su ayuda,no han dejado como trabajo buscar articulos sobre citogenetica molecular de Fish a partir del año 2004 he estado buscando y solo llegue a encontrar uno(y nos han pedido como minimo 3 articulos) ,he estado consultado con mi profesor acerca del tema y bueno el quiere que nos centremos en la tecnica ,en que consiste (de forma general) menionar acerca del CGH,….quizas usted conozca alguna pagina donde se hayan hecho estudios recientes sobre este tema,yo le estare muy agradecida..

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  34. Hola Gaby, desde ya quiero felicitarte por tu blor, la verdad me sirvió mucho para comprender las técnicas. Estoy estudiando la Licenciatura en Ciencias Biológicas y la verdad estoy teniendo problemas para resolver ejercicios acerca del southern blot o northen blot con respecto a las sondas y que se ve luego en la autoradiografia. Sabés de donde puedo sacar ejercicios resueltos para comparar o material bibliográfico sobre las sondas de ADN o ARN qque son utilizadas para cada caso y como se pegan.
    Desde ya, muchisimas Gracias.
    Un saludo
    Gise

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    1. Hola Gise muhcas gracias por el comentario. Donde estudias? en que Universidad?
      Mira yo solo tengo un power point de resolucion de ejercicios que se dan en las clases de genetica de Veterinaria de la Universidad de Buenos Aires. Podes descargar el archivo en https://genmolecular.wordpress.com/descargas-de-presentaciones/
      Se llama ejercicios de Biologia molecular.
      En castellano es difícil encontrar estas cosas.
      Espero te ayude un poco.
      Saludos

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  35. Como siempre mil gracias por tu ayuda. Una pregunta mas, sabes donde puedo encontrar informacion sobre tecnicas de expresión de proteinas. Western Blott y RIPA??. mil gracias

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  36. Hola muy buen dia, como siempre mil gracias por toda esta información. Tengo una pregunta. En una electroforesis de ARN salen distintas bandas y me preguntan que tiene cada banda… es decir me dicen que siempre la primer banda que corre tiene un tipo de arn, la segunda otro y asi sucesivamente….AGRADECERIA MUCHO LA RESPUESTA

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    1. Buenas noches Oskar, no me queda claro quien te lo pregunta o quien te lo dice-
      Las electroforesis de ARN no son muy claras porque hay que tener en cuenta que en la extracción se obtiene todos los tipos de ARN, o sea los mensajeros que son la mayoría, los ARN de trasnferencia y los ribosomales, generalemnte migran en ese órden. Los mesnajeros producen la banda mas cercana a los pocillos y luego se ve una nube por le enorme cantidad de mensajeros de distitno tamaño. Los que migran más lejos son los más pequeños que son los ribosomales
      Cualquier cosa puedes consultar libros técnicos más específicos como el Sambrook y Maniatis o el Current protocols on line.
      Espero haber ayudado
      Saludosss

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  37. Dra. son muy pocas las paginas que uno encuentra con este tipo de informacion, yo como biologo y docente agradezco que personas como usted lo hayan hecho, la verdad despues de tantos comentarios tan positivos no puedo exaltar mas este trabajo.

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  38. soy estudiande de biotecnologia y la verdad que se me a echo muy interesante los videos que ha puesto… soy muy ilustrativos. seria bueno que tambien pudiera poner información, bibliografica…
    saludos y exitos

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    1. Hola Mauro, Perdòn pero estuve de vacaiones y luego con un problema con alguien que ha plagido parte del Blog.
      La Bibliogrìa la he puesto en una página aparte. Si vas a la pagina principal o Home de este sitio, arriba puedes buscar bibliografìa, aunque la mayoria de las cosas están escritas por mi luego de muchos años de clases y cursos
      Saludos

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  41. hola! soy estudiante de medicina de la UCSC, Chile. voy en 2° año…
    me a parecido muy bueno el blog, muy interactivo, se nota que le gusta lo que hace!! 🙂
    no se si pueda ayudarme, necesito informacion sobre tecnicas de diagnostico molecular para la fenilcetonuria!!
    de antemano muchas graciaas 🙂 !!

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    1. Hola Valentina, desde ya muchas gracias por las palabras tan cáildas acerca del Blog.
      La verdad es que lamneto no poder ayudarte porque soy Médica Veterinaria y no he buscado diagnóstico molecular de fenilcetonuria.
      Ha probado bucar en Google en español? y en inglés?
      Otro sitio para busqueda de bibliografía específica es el de PUBMED. http://www.ncbi.nlm.nih.gov
      Allí se puede buscar bibliografía en PUBMED relativa al team. El problema es que está en inglés. Si no lo maneja, sería bueno que alguin le de una mano
      Gracias y espero haber ayudado un poco.
      Saludos
      GAby

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  42. Pingback: Desde Mendel hasta las moléculas | chilelab.cl

  44. Previos saludos Dra. Gaby, muy bueno lo publicado en la web me encantaría poder comunicarme directamente con usted a través del mail, quiero hacerle algunas consultas con respecto al equipamiento ya que se tiene un presupuesto relativamente como para implementar un laboratorio con reactivo y obviamente capacitación.

    Agradeceré mucho su gentil atención.

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  45. Este sitio es un gran aporte a quienes estudiamos las ciencias biologicas, por favor si me colabora para hacer practicas de biologia molecular lo mas sencillas ya que en donde trabajo no se cuenta con un laboratorio completo, gracias

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    1. Hola Nelly la verdad es que es muy difícil hacer prácticas aunque sean sencillas si no cuentan con laboratorio. Sólo tengo ejercicios de aprendizaje para descargar en la página de descarga de archivos. Las pr[acticas requieren mucho equipamiento en todas las técnicas que conozco. Hay alg[un video en You tube que muestra una extracci[on de ADN en forma casera. Tal vez puedan hacer eso.

      Saludos
      Gaby

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  48. HOLA DRA. SOY ESTUDIANTE DE BIOQUIMICA , Y ESTA PAGINA ME RESULTA MUY UTIL PARA MIS ESTUDIOS YA QUE ESTOY CURSANDO LA CATEDRA DE BIOLOGIA MOLECULAR Y MUCHAS COSAS APRENDO DE ESTE SITIO WEB. LA FELICITO POR SU LABOR Y LE DESEO MUCHOS EXITOS Y GRACIAS POR CREAR ESTOS SITIOS . ATTE LA SALUDO CON MI MAYOR RESPETO:

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      1. muy buen post… soy estudiandte de licenciatura biogenetica y bioquimica soy de argentina de la provincia de la rioja. con estos videos me quedo mas claro el tema. gracias por el post. espero su respuesta

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  49. Excelente pagina y links, soy profesora universitaria y estaba curioseando formas de resumir en breve tiempo un tema tan largo y tan completo, la pagina me dio muchas ideas. Que agladable encontrar sitios con toda la calidad academica y terminos tan sencillos.
    Gracias y claro la cancion es de lo mejor…
    Olga

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  50. Hola!quería.consultarte.preguntandote.que.opinión.te.merece.las.prácticas.caseras.de.extracción.de.ADN.que.hay.en.internet…las.que.usan.detergentes.y.alcohol.isopropilico????Lo.que.se.obtiene…qué.es??como.puedo.estar.segura.que.lo.que.tengo.es.material.genetico??el.adn.no.se.observa.a.simple.vista…entonces…cómo.es.que.en.una.muestra.casera.si….tu.foto.con.el.tubo.de.ensayo…cómo.sabes.que.es.ADN???’te.agradeciería.tu.opinión.yo.soy.docente.y.me.gustaría.tener.claras.estás.respuestas.para.luego.evaluar.si.realmente.es.aceptable.relaizar.la.practica.en.el.aula…gracias.por.tu.tiempo!!natalia.

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    1. Hola Natalia, es un buena pregunta. Las extracciones de ADN casero, solo imitan los protocolos científicos de extracción de ADN que se hicieron cerca del los años 70s y 80s. Todos los protocolos cinetíficos para realizar la extracción de ADN se basan en dos metodologías pero en la extracción casera se muestra el más simple que es la técnica del salting out, es decir aquella que usa sal para precipitar el ADN y alcohol para que se suspenda en él el ADN.
      Si lo razonás es simple, lo que uno necesita para sacr el ADN de las células es, en primer lugar disolver las membranas de las células (doble capa lipídica) usando detergentes. Por otra parte es necesario desahacerse de las proteínas. Allí en el video usan una sustancia ablanda carne o sea una serie de enzimas que digieren proteínas. En los protocolos científicos se usa la Proteinasa K. Usando todo eso logras sacar todo lo que no sirve y quedrate con lo que hay dentro del núcleo que es el ADN. Tal como lo ves en el tubo de la foto es el ADN, parec una sustancia mocosa. Ese ADN luego se disuelve en un buffer hasta que ya no puede verse se homogeiniza. Y para comprobarlo, el ADN así es un buffer podés sembrarlo en un gel de agarosa al que se tiñe con Bromuro de etidio que es un colorante específico de ácidos nucleicos y que solo se ve bajo luz UV de color narajana.
      Yo creo que si se puede hacer en el aula, solo que luego si no tienes cuba de electroforesis para mostrar el ADN teñido, puede mostrar fotos que hay muchas en internet.
      Espero haber ayudado.
      Saludos
      Gaby

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  51. Siempre respondes mis preguntas bien ;D. tengo otra

    que puedo hacer con PCR, southern, northern , western y DNA recombiante para aplicarlo a las Ciencias biológicas?
    Asi aplicaciones

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    1. Hola Marcelo esto está en la página principal: diganóstico de enfermedades hereditarias y metabólicas, terapia génica, vacunas más eficientes, diagnósticos rápidos de distintos tipos de enfermedades por PCR, la aplicación al control epidemiológico de enfermedades infecciosas (es decir determinar el orígen de una cepa viral o bacteriana y como entró en una región), control de contaminaciones alimenticias (ver en descarga de archivos la detección de E.coli productora de sindrome urémico hemolítico) , el mejoramiento de especies vegetales y animales, etc.etc.etc.etc.
      saludos

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  53. Hola Dra.
    Me encanta su sitio web, soy estudiante de medicina recien en el primer año, y no se si podría ayudarme sobre las aplicaciones del PCR en la medicina.
    Le agradesco antisipadamente por su respuesta.

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    1. Gracias Kathy, realmente son muchas y están enumeradas en la pagina principal, pero a modo rápido, te diré que podes detectar infecciones virales como HIV o Hepatitis, infecciones bacterianas y de que tipo de cepa estás hablando, estudios de culaquier tipo de enfermedad hereditaria como hemofilia, daltonismo o fenilcetonuria, restrear contaminación por bacterias en comida, saber de donde vien una cepa que está causnado una epidemia, etc etc etc
      Saludos

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  54. muy muy bueno el blog muchas felicidades sigue asi no imaginas cuanta ayuda nos brindas a los que aun estudiamos y no entendemos ni papa a los docentes jeje

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  55. hola
    me gusta esto , pero siempre me ha costado poder descutir una electroforesis, a veces lo del final son exceso de primers (cebadores) o tambien puede ser rna degradado , lo cual me causa muchos problemas al hacer informes…
    habra algun libro o paper donde salga como se puede interpretar una electroforesis de la mejor manera?
    Saludos

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    1. Marcelo, la verdad es que eso es una cuestión de práctica, no creo que lo encuentres en un paper. En general te lo explican las personas con màs experiencia, en mi caso al menos los excesos de cebadores son muy claros y podès bajarle la cantidad de cebadores de la reacción para evitar el ruido. El ADN degradado se ve mucho màs arriba en el gel y es en general a todo lo largo de la calle sembrada. El ARN no deberìa aparacer en el gel si la extracción de ADN es buena, y si usas la formula casera de extracción agregale al ADN en la reacción RNasas durante la extracciòn o en el buffer TE al resuspenderlo, eso quita todo el ARN.
      Espero te haya servido
      saludos
      Gaby

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  56. En verdad son mis primeros pasos en genetica y me ha ayudado mucho, te felicito por el trabajo, de seguro pasare pegado en esta pagina todos estos dias para entender todo lo que me hace falta…. te molestare con algunas preguntas en el futuro..

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  57. buenas tardes gaby me podria ayudar con este acertijo cientifico:

    La mitología los conoció, la mayoría les temen y son considerados muy útiles

    algunas pistas son :
    *siempre han existido
    *se multiplican desde los 70’s
    *no existen leyes para ellos
    *son conocidos como un insulto para la biologia

    Empieza con “O”

    y son 2 palabraz

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  58. Gracias nuevamente por tu respuesta, lo q pasa es q lo lei varias veces de la guia pero la verdad no me cerraba el tema, voy a leerlo una vez mas a ver si logro cerrar la idea. Gracias!

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  59. Nuevamente acá, tengo unas dudas, a ver si me podés ayudar. Los marcadores moleculares son secuencias polimórficas de ADN, pero no entiendo bien para que estásn, para que las estudiamos. Y otra duda son los bandeos…son técnicas para observar diferentes cosas en los cromosomas? x ej el bandeo C sirve para evidenciar heterocromatina…y el bandeo G,Q y R, o el NOR, para que se hacen? Bueno, espero se haya entendido la pregunta

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    1. Juli, tenés que leer un poco más lo que dice el Blog pero esto no es un reemplazo de la lectura. En la guía de lectura de la materia lo aclara muy bien.
      De todas fromas te copio algunas de las frases del Blog:
      Aplicaciones de las técnicas

      Son inmumerables las aplicaciones de estas técnicas y quizás las más usadas hoy en dia, son la PCR seguida de una restricción con enzimas y detección de los fragmentos en un gel o seguidas de un gel de poliacrilamida que tiene más definición para la separación de fragmentos de pocas bases de diferencias. Cuando se usa PCR y enzimas de restricción se denominan PCR/RFLP (derivado de variación en la longitud de los fragmentos de restricción en ingles).

      Esta técnica puede usarse entre otras cosas para detección de alelos de un gen normales y mutados (enfermedades hereditarias) o para distinguir cepas bacterianas o virales o alelos más favorables para una característica de interés productivo para luego aplicarlo a la selección.
      Usos en la criminología o medicina forense en este caso con Southern blot y RFLP
      Y detección de genes cuya secuancia no se conoce completamente y se usa un marcador ligado o crecano en el cromosoma
      En cuanto a cariotipo está en la pagina de cromosomas y cromatina
      El análisis de los cromosomas de un individuo se realiza mediante una técnica denominada CARIOTIPO que se base en obtener una foto de cromosomas en Metafase de la división celular,en dónde alcanza mayor estado de compactamiento. Generalmente luego se realiza el bandeo cromosoómico para ayudar a identificar a los cromosomas ya que cada uno tiene un patron de bandas propio de ese cromosoma en cada una de las especies difrentes.
      Pero no te olvides de leer libros o la bibliografía que te han dado
      Saludos
      Gaby

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    1. Hola Adriana, la técnica de Fisch es una combinación del uso de sondas marcadas sobre un conjunto de cromosomas o sea un cariotipo, para poder visualizar los cromosomas de manera más exacta. Fijate en la pagina de Cromosomas
      Saludos

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    1. Hola Ricardo, en este momento estoy instalándome en la Universidad de Rio Negro, por el momento el hacer un curso online está un poco lejos pero ya veré de implementarlo lo antes posible. No ´se si existe otro en Argentina pero es un proyecto que tengo. Saludos, Gabriela

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  66. Hola, espero pueda ayudarme, me interesa saber si el estudio del ADN genomico es mejor que el de ADN mitocondrial para determinar la variavilidad genetica de una especie? y segun su punto de vista, me diga el porque de su recomendacion, espero de verdad me pueda contestar ó enviarme informacion ala brevedad posible, de antemano le doy las gracias.

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    1. Hola Sheyla, en verdad no he trabajado ni leído mucho acerca de que metodo es preferido, pero te diré que por lo poco que he leído el ADN mitocondrial, tiene algunas ventajas para el rastreo de los orígenes del hombre y árboles filogenéticos, porque como sabrás las mitocondiras poseen su ADN separado del nuclear, con más alta tasa de mutaciones y se heredan muchas de madre a hijos, por lo tanto no se necesita tanta muestra y no sufren recombinación, en cambio en el caso del genómico estrás evaluando a todos los individuos con todas sus posibles combinaciones. (Tanto machos como hemras, y su descendientes). Obviamente es una serie de experimentos muy dificultosos si tienes que analizar muchas muestras y evaluar el mejor software para analizarlo. Por la teor{ia sería mejor el genómico en mi opinión pero muhco más complejo de llevar a cabo. De todas maneras no te bases solo en mi opinión porque como ya te aclaré no soy experta en el tema.
      Espero haber ayudado un poco.
      Saludos

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  67. La verdad esque sois todos unos putos frikis de mierda. No os da verguenza? Miraros al espejo!!! con vuestras gafas de pasta empollones, y las ostias que os pegarian en clase deberiais estar viviendo debajo de un puente, pero todo con cariño que soy un gran fan de la biologia tambie… y de vuestra puta madre!!!!!

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  70. Pingback: IMPORTANTE « Desde Mendel hasta las moléculas

  71. Hola, Tu presentacion es insuperable.
    Deseo saber Si conoces tu y tu amplia audiencia un centro donde reciban internos para La prueba de fish. hasta pronto.

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    1. Hola Humberto, la verdad es que no conoczco un lugar aqui en Argentina donde reciban internos, pero por ahi laguien lo lee y se interesa. Esperemos que alguno se interese.
      Gracias
      Saludos
      Gabriela

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  72. Hola muy buenas noches, es la primera vez que visito esta pagina y quede realmente maravillado, me voy a ensenada b.c mexico precisamente a estudiar tecnicas en biologia molecular y esto esta increibleeeeeeeeee…mil gracias

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  73. hola gaby, soy carlos de mexicali, espero que me recuerdes, te comentaba que si vivias en buenos aires, lo que pasa que voy a ir a buenos aires en el mes de febrero del proximo año ya que realizare una estancia de investigacion en el INTA me imagino que si lo conoces. Espero que puedas recibirme ya que no conozco la ciudad y no tengo todavia donde vivir espero que me puedas ayudar, te lo agradeceria muchisimo tu ayuda.

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    1. Hola Carlos, si claro que concozco el INTA, pero ya en Febrero no estaré por aquí. Si tines ya a quien va a dirigirte allí en el INTA de seguro te podrá asesorar. Si no encuentras ayuda, quizás el Dr Pinto de la Facultad donde yo trabajo pueda darte una mano. En todo caso mandame un mail a chickmhc@gmail.com que te paso su correo electrónico. Saludos
      Gaby

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  74. hola gaby, soy carlos de mexicali, espero que me recuerdes, te comentaba que si vivias en buenos aires, lo que pasa que voy a ir a buenos aires en el mes de febrero del proximo año ya que realizare una estancia de investigacion en el INTA me imagino que si lo conoces. Espero

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  76. hola gaby estoy estudiando la maestria y me gustaria saber si puedes ayudarme con articulos relacionados con VNTR que se hayan hecho ultimamente para M. bovis en animales te lo agradeceria de antemando desde Mexicali, Baja California. Mexico.

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    1. Hola Carlos, me alegra saber que estás estudiando una maestría. En cuanto a lo que me pides, yo no trabajo en VNTRs ni en bacteriología, así que no tengo artículos referentes al tema.
      Lo que te puedo recomendar, así como lo hice en su momento con mi tema de tesis es que busques con las palabras claves en la base de datos más conocida que es PubMed. http://www.nci.nlm.nih.gov
      En ese sitios está lo mejor publicado en todos los temas biológicos. Te saldrán todas las citas y en que revistas están. Por ahi ya lo has hecho. Pero si no has tendio uenos resultados pruea cominar las palbaras claves y lyego trata de seguir a los autores reconocidos en el tema.
      En cuanto a a donde vivo, si es en Buenos Aires, pero por muy poco tiempo. Me estoy mudando a otra ciudad. De todas fromas si puedo ayudar, aqui estaré.
      Saludos
      Gaby

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  77. EXCELENTE TRABAJO Y EQUIPO QUE PRESENTAS,
    ME HAS SALVADO LA VIDA
    TENGO QUE PRESENTAR UNA EXPOSICION DE TECNICAS MOLECULARES PARA MI MATERIA DE MICROBIOLOGIA . SOY ESTUDIANTE DE MEDICINA. Y ESTOY EN LABORATORIO MANEJANDO PCR, TR

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    1. Manuel!!! que alegría tenerte por aqui. Ya ves la vida me trata como puede, me vapulea un poco pero ya se arreglará. Disculpas que no he entrado mucho a tu Blog pero he estado muy ausente por motivos personales. MIl gracias por el video, ya me voy a verlo. UN abrazo. Gaby

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  80. Ok Gaby, mil gracias por la informacion. Revisaré la pagina de vetermiaria que me recomiendas.
    Pero si tengo muchisimo interés en lo de la pasantìa. En resumen, soy licda en química biológica, hace 2 años hice con una media beca un master en Biotecnologia en Madrid, pero no hubo NADA de prácticas de laboratorio, estaba más enfocado a gestionar áreas de Biotecnología.
    Yo encantada y agradecida de todas formas. Regresé y el master me abrió puertas para trabajar en ventas para el área química en una farmacéutica, y está bastante bien si querés verlo desde un punto de vista laboral, pero aqui hay mucha falta de una buena asesoría práctica en este campo….y la experiencia me serviría muchìsimo para ampliar el campo de trabajo, ya que la teoría no basta mujer!…jijiji
    Tienes alguna direcciòn electronica para escribirte proximamente y tratar de seguir en contacto cuando estés en la otra universidad….y ya tratar términos fijos de cuándo y cuánto tiempo y plata sería lo de la pasantía?
    Muy agradedcida una vez màs por tu info….y un abrazo dedsde Guate!
    Pili

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    1. No puedo creer lo que me dices del Master, yo hice uno también pero con mucha práctica. Después aprendí un poco sola. Entiendo lo que me cuentas y desde ya encantada de ayudarte. Si quieres con todo gusto me escribes a chickmhc@gmail.com que te contesto con mucho gusto. Gracias de vuelta.
      Abrazo desde Buenos Aires

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  81. Excelentes páginas!!…felicitaciones en verdad.
    Al igual que los demás, me uno a la utilización del soprendente material y lo agradezco Gaby.
    Quisiera porfavor que me indiquen de algún curso práctico de laboratorio en su país (un par de semanas), para obtener una certificación en las técnicas de biología molecular. Mil gracias.
    Pili. Guatemala.

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    1. Hola Pili, como estás? Muchas gracias por el comentario y no tenés nada que agradecer, estoy muy contenta de haber hecho esto y que sirva a los demás.
      En cuanto a lo que me decís de cursos, en la pagina de la Facultad de Ciencias Veterinarias (www.fvet.uba.ar) podrás ver un Curso de Marcadores moleculares que está por comenzar pronto en la cátedra de genética, pero yo no participo más de ese curso. Por otra parte a fin de año me voy a otra Universidad y veré que puedo hacer allí. no sé si contaré con material para un curso práctico, pero si lo hago estará de seguro la promoción en este Blog. Quizás consigas algo de financiación para hacer alguna pasantía en nuestro laboratorio, pero es paga. En ese caso yo te podría dirigir la pasantía.
      Espero haberte ayudado.
      Saludos
      Gaby

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  82. ola gaby, disculpame la molestia, qeria preguntarte si cuebtan con presentaciones en ppt o animaciones bien detalladas sobre los precesos q se llavan a cabo en la maduracion del RNA, gracias

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    1. Hola Javi en la pagina descarga de archivos hay una clase de biología molecular en ppt. Por otra parte hay animaciones en la pagina replicación y transcripción. Espero te ayuden y si necesitpas los videos estpan para bajar en You tube, saludos
      Gaby

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  83. Dra. Gabriela:
    Es un placer conocerla, buscando informacion del Dogma de la Biología encontre su página que la considero excelente. Siga hacia adelante que desde Puerto Rico le auguro mucho éxito.

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  86. hola gabriela solo escribia para felicitarte la verdad me has ayudado y facilitado mi estudio, me ayudo muchisimo para comprender lo que en clase mi maestra trato de explicarnos de la mejor manera posible…. en cuanto vea a mi maestra le comentare acerca de tu pagina y a mis compañeros….. gracias y espero la pagina siga siendo todo un exito.

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    1. Hola Paola, no sabés cuánto me alegra ver como te ha gustado la página pero, por sobre todo que me digas que te ayudó por que creo que es lo que mas importancia tiene.
      Muchas gracias por tan lindo comentario,
      saludos
      Gaby

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  88. Dra. Su investigaciòn es simplemente esombrosa, es mi primer año en la Universidad de San Carlos de Guatemala y en septiembre se realizara el II Congreso nacional de ciencias basicas en medicina clinica. Por lo que estamos ya, investigando varios temas. Entre ellos tenemos este: Aplicaciòn de PCR-ADN en el diagnòstico de la infecciòn por VIH-1 en infantes. Y èstas tècnicas nos serviràn Muchisimo! Muchas gracias!

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    1. Hola Fabián, gracias de verdad por lo que me comentás. En realidad tdoas estas técnicas han sido tan maravillosas para ser aplicadas al diagnóstico que han cambiado los pronósticos médicos para darlos con más certeza y precisión. A pesar de ser Médica Veterinaria, siempre me ha atraído la aplicación de todas estas técnicas para ayudar a la gente y sin duda el proyecto que tiene se extenderá de seguro a muchas otras virales como hepatitis C, y otros. No es mi tema pero me gusta mucho y siempre me da inquieteud empezar a buscar sobre más temas pero no me dan los tiempos a veces. Ojalá tuviera dinero para asisitir a tu país que de seguro es maravilloso. Acabo de volver de EEUU pero pude ir porque me lo financié con mis propios proyectos. Desde ya en lo que pueda ayudar, solo tenés que escribirme.
      Muchas gracias a vos por tan lindo comentario.
      Saludos
      Gaby

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  89. hola Gabriela,
    Ee video de la explicacion sobre la PCR es el mismo que nos puso nuestro profesor de genetica en la universidad. La verdad que ayuda mucho a la hora de estudiar.He leido algun comentario que hablaban de la letra de la cancion de la PCR. Estudiando para el examen de genetica y buscando videos en el youtube vi ese video y no me resisti a buscar si alguien habia escrito la letra. la encontre. asi que se la dejo aqui tambien:

    The PCR Song by Scientists for Better PCR

    There was a time when to amplify DNA,
    You had to grow tons and tons of tiny cells.
    (Oooh) Then along came a guy named Dr. Kary Mullis,
    Said you can amplify in vitro just as well.

    Just mix your template with a buffer and some primers,
    Nucleotides and polymerases too.
    Denaturing, annealing, and extending,
    Well it’s amazing what heating and cooling and heating will do.

    [Chorus]
    PCR when you need to detect mutation (detect mutation)
    PCR when you need to recombine (recombine)
    PCR when you need to find out who the daddy is (who’s your daddy?)
    PCR when you need to solve a crime (solve a crime)
    [x2]

    [Advertisement]
    (PCR) To all the scientists out there doing PCR, Bio-Rad salutes you with the all-new 1000 series thermal cycling platform.

    la verdad, que ha creado una pagina muy util. ahora mismo estoy haciendo un trabajo sobre un articulo de genetica y poder ver imagenes de los metodos que se utilizan y de otras aplicaciones que pueden tener me ha ayudado mucho a comprender el sentido del experimento y a hacer un mejor trabajo. enhorabuena por la pagina.
    saludos

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    1. Hola Choni, muchísimas gracias por tu comentario y gracias por el aporte de la letra que no la tenía con tanto detalle, así que ahora podría agregarle los subtítulos, así todos lo entienden, gracias!!!!
      Saludos
      Gaby

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  90. Hola Gabriela muy buen trabajo el tuyo. Te cuento que estoy trabajando en trasplante con modelos experimentales y me gustaría saber que técnica me conviene usar para reconocer el origen de cada tejido (donante o receptor) en la muestra de anatomía patológica. Muchas gracias.

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    1. Hola Victor, yo toco de oído en este tema porque no he hecho transplante pero he estado averiguando y lo que me preguntas, es imposible de hacerlo. La unica manera de hacer eso, seria imaging, por ejemplo, si marcas las celulas del donante antes de trasplanta, y post-trasplante haces un imaging, es la unica manera.
      Lo que si puedes ver en la muestra de anatomia patologica, si hay rechazo o no, algo parecido de la inflamación. Es una rutina ya. Pero al estar el tejido ya muerto y fijado no hay ninguna técnica de Biología molecular que puedas usar.
      Gracias por tu comentario.
      Gabriela

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  91. Gracias a Ud. Doctora he podido comprender muchas cosas de las cuales dudaba o no recordaba, pues soy Tecnologo medico en la especialidad de Laboratorio Clinico y llevamos el curso de Biologia como curso comun y no de carrera y se nos explica muy por encima todos estos conceptos, actualmente estoy haciendo un curso en tecnicas de biologia molecular en malaria y ahora comprendo porque hago tal o cual cosa, la Biologia es interesante y muy amplia, gracias una vez mas.

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    1. Muchas gracias por dejar tu comentario y me alegra mucho sabre que sigue sirviendo para muchas tipos de estudiantes y curisooso que quieren aprender. La biología es más que interesante y avanza muy rápido.
      Gracias y saludos
      Gaby

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  92. hola me agrado tu trabajo , fijate que me encantaria que me mandaras una pocoa de informacion acerca de la tecnica de VNTR ya que de eso se trabajara para mi proyecto de tesis de maestria, y pues no estoy muy ilustrado sobre la tecnica. Quisiera saber como se hace y cuantos oligonucleotidos necesito para trabajarla. Telo agradeceria infinitamente que me mandaras una poca de informacion

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    1. Hola Carlos muchas gracias por tu comentario, te mandaria informacion pero la verdad es que no trabajo ene so, ahora estoy haciendo un entrenamiento en EEEUU en anlaisis de SNPs para genotipificar heterocigotas de un gen en particular. Lo que si te puedo comentar es que supongo que lo haras para paternidad, pero la cantidad de oligos y cuales depende de cada especie, para paternidad se cree que deben usarse por lo menos 9 VNTRs o Short tandem repeats.
      Espero te haya servido, yo solo escribi sobre la tecnica pero no la he usado y como te digo es muy variable segun la especie.
      De todas fromas avisame si te hace falta algo mas.
      Saludos
      Gaby

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  93. definitivamente, es un exelente trabajo el que ested hace Doctora, muchas personas con conocimiento deberían tomar su ejemplo y así poder difundir sus conocimientos. Soy estudiente de doctorado en ciencias médicas y biológicas en la Facultad de Medicina de LA Universidad Autónoma Benito juárez de Oaxaca. Estaré pendiente de sus enseñanzas, gracias y felicidades Doctora.

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  94. Hola
    Creo que tomare en cuenta tu opinion y me centrare en algun tipo de PCR en mi trabajo. Es genial que alguien que sabe de este tema me ayude a resolver mis pequeñas dudas. Espero obtener buena nota,jeje
    Gracias

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  95. Hola, le he hechado un vistazo a tu articulo y pienso que esá bastante trabajado y muy completo en fin que está bastante bien, y queria perdirte ayuda, ya que tengo que hacer un trabajo sobre tecnicas en genetica molecular, y no me decido sobre cúal de todas ellas tiene especial relevancia, si la PCR, FISH,…o alguna otra.
    ¿me podrias hechar una mano?
    Gracias

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    1. Hola Sara, creo que quiza la PCR fue una de les tecnicas de bielogia molecular mas relevantes que se han descripto y que sigue teniendo un uso increible en multiples disciplinas. Claro que esa es mi opinion, espero que te sirva pero me parece que el FISH es mas especifico al igual que otras tecnicas aqui descriptas.
      Saludos
      Gabriela

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  98. Hola Manuel, si claro que lo es, está en la página Acerca de mí. Solo era un chiste a tu comentario halagador para conmigo. Es un placer poder divulgar lo que uno ha aprendido a través de la experiencia. Sin duda coincido con vos. Espero ser buena en ambas cosas aunque muchas veces a los excelentes investigadores les cuesta dar clases, al menos aqui, en Argentina. Pero en la Universidad es de suma importancia que des clases de aquello en lo que trabajas.
    Saludos a vos tambien

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  99. ¿Qué lo tuyo no es la investigación?. No lo sé porque no conozco tu trabajo, pero yo soy de los que opina que es muy difícil hacer buena divulgación científica sin investigar, que es la forma de estar en la brecha y conocer de primera mano todos los avances en ciencias. Todos mis mejores profesores (los que han convertido en mis maestros) eran excelentes investigadores.
    Saludos

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  100. ¡¡¡¡GRACIAS MANUEL!!!!! ES UN GRAN HALAGO PARA MÍ, O ¿SERÁ QUE LO MÍO NO ES MAS LA INVESTIGACION? JAJAJAJJA.
    LÁSTIMA QUE A UNO NO LE PAGAN POR HACERLO ¿VERDAD? POR AHORA SOLO TRATO DE HACER LO MEJOR Y DE SEGURO QUEDA MUCHO POR HACER. ES FANTÁSTICO EL TRABAJO EL QUE ESTÁ HACIENDO TU. FELICITACIONES
    GABY

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  102. PEDRO, ME HACE MUY FELIZ SABER QUE HA COLABORADO EN TUS CLASES Y MUCHAS GRACIAS POR TUS CONCEPTOS. EN CUANTO A LO QUE ME SOLICITAS, COMO HABRÁS LEÍDO EN EL BLOG NECESITAS UNA MAQUINA TERMOCICLADORA O PCR, LOS PRIMERS ADECUADOS DE CADA ESPECIE PARA AMPLIFICAR LOS VNTRs O MICROSATÉLITES (DEBEN SER 9 COMO MÍNIMO Y LOS QUE SEA DE MAYOR CANTIDAD DE ALELOS EN LA POBLACIÓN) Y LUEGO UN GEL DE GRAN TAMAÑO DE POLIACRILIMIDA QUE LO LEA UN SECUENCIADOR DE ADN PARA DARTE LOS PICOS DE CADA TAMAÑO DE LOS MICROSATÉLITES. YO NO TRABAJO EN ESO PERO SOLO ES UNA AYUDA. EN EL NCBI (WWW.NCBI.NLM.NIH.GOV)HAY BASES DE DATOS AL IGUAL QUE EN LA INTERNATIONAL SOCIETY OF ANIMAL GENETICS PARA BUSCAR LOS PRIMERS DE CADA MICROSATELITE.
    sALUDOS
    GABY

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  104. felicitaciones Doctora, muy espectacular el estudio presentado, necesito un gran favor, el prosedimiento de la tecnica paternidad responsable y materiales a utilizar.
    tecnicas en la utilizacion de marcadores.
    muchas gracias, soy de Montería cordoba colombia y trabajo en la universidad de cordoba, estas tecnicas son para orientar mas a mis estudiantes. Gracias.

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  107. Vladimir fijate que ya te contesté lo de paternidad. No sé que más necesitás. Todo lo que me pedís en el segundo mensaje es demasiado para el tiempo que dispongo. Por ahi de a ratos podrés ir ayudando. Gracias

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  109. Hola de nuevo y gracias por responder mi solicitud, otra vez felicidades por tu pàgina, espero que me puedas ayudar con lo siguiente y si no gracias. mira tengo un trabajo de biologia molecular que debo hablar 1 sobre las normas minimas sobre bioseguridad en un laboratorio de biologia molecular 2 tecnicas utilizadas y sus respectivos equipos y reactivos a utilizar decir brevemente la funcion 3 Personal requerido y titulo profesional que debe tener 4 infraestructura del laboratoria (areas que debe tener) debes ser una persona ocupada pero si me puedes ayudar con todo o con algo te lo agradecerè mucho yo estudio bacteriologia y laboratorio clinico en UDES de colombia y encuentro poco sobre esto. Para mi la biologia molecular me llama mucho la atencion y quiero trabajar en ello. Bueno que estes muy bien y estare viendo tu pagina constantemente termino con un chiste quiero fabricar la proteina sabrosa jajaja espero que me ayudes.

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  110. Hola Vladimir, muchas gracias por tu comentario.
    Para hacer pruebas de paternidad y como habrás leído en la página se usan VNTRs o microsatélites. Hoy en día para amplificar esos microsatélitos (9 como mínimo en cada especie) necesitás los primers para realizar la amplificación por PCR, así como todos los reactivos de una PCR,(Taq polimerasa, dNTPs, Buffer y agua) asi que necesitarías una PCR o equipo termociclador. Luego para ver las diferencias de tamaño en los productos de amplificación de la PCR y poder distinguirlos correctamente, se usa un secuenciador de ADN que lee los tamaños de los fragmentos amplificados y corridos en geles de poliacrilamida. También se ha empezado a usar equipos más modernos de secuenciación como la pirosecuanciación.
    Son todos equipos costosos. Espero que te haya sido de ayuda.
    Saludos
    Gaby

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  111. Hola Dra.

    Es muy interesante tu página muy educativa, me podrias ayudar necesito saber cuales son las diferentes tecnicas utilizadas actualmente para pruebas de paternidad utilizando la biologia molecular y que equipos, materiales son necesarios en estas.

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  112. Monse, me alegra profundamente saber que te haya gustado y ayudado.
    Tu tema de tesis es muy intersante y relacionado con mi tema de trabajo en resistencia genética a enfermedades usando los genes del Complejo Mayor de Histocompatiblidad, aunque en pollos.
    Estoy a tu dispoción y desde ya muchas gracias por tan lindo comentario.
    Saludos
    Gabriela

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  113. Hola Dra.
    Felicidades, me encanto su sitio, estoy estudiando una maestría en salud publica y planeo realizar un proyecto de tesis sobre susceptibilidad génetica en pacientes diabéticos para el desarrollo de tuberculosis pulmonar, x lo que planteo medir TLR, MBP y/citocinas, pero en realidad no tengo muchos conocimientos sobre biología molecular, pero es algo que me interesa mucho, por lo que toda esta información me ha ayudado mucho para aclarar algunas dudas que tenía.
    Muchas gracias.

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  120. Gracias María José la verdad es que es muy original y para no olvidársela, pero como decís está inglés…una pena, habrá que esperar que algún creativo haga una en castellano no? bueno le podría pedir a mi hermano que es músico, me diste una idea. Gracias por tus comentarios que demuestran tu interés. Saludos. Gaby

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  123. Excelente!!! que bueno que los estudiantes de todo el pais puedan tener acceso a conocimiento tanto basicos como avanzados de genetica. Este sitio debiera ser declarado de interes y debiera divulgarse su existencia como material de consulta en las escuelas.
    Que bueno que aun queda quien se toma semejante cantidad de horas para divulgar y compartir su pasion por el conocimiento. No soy muy Sarmientista, pero “educar al soberano” Gracias doctora

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